اهلا وسهلاً بكم زائر
 
الرئيسيةاليوميةمركز رفع المجموعاتالأعضاءس .و .جبحـثالتسجيلدخول
السلام عليكم زائرنا الكريم واهلا بك في منتدى الجمعية العربية للعلوم الاقتصادية والاجتماعية الزراعية - فرع اليمن 
يمكنك التسجيل معنا زائرنا الكريم و متابعة الدروس في قسم الدروس التعليمية لتحصل على شهادة مشاركة في برنامج الـ SPSS من الجمعية بعد انتهاء الدروس و قدومك لاختبار الـتقييم حظاً موفقاً (دروسنا مجانية)

تقنية الاليزا

حفظ البيانات؟
آخر المواضيع
الموضوع
تاريخ ارسال المشاركة
بواسطة
دكتور #اسنان فى مدينة نصر | #اسنان | زراعة #اسنان# #عيادة اسنان | #زراعة اسنان | #اطباء اسنان في م دكتور #اسنان فى مدينة نصر | #اسنان | زراعة #اسنان# #عيادة اسنان | #زراعة اسنان | #اطباء اسنان في مدينة نصر| #تجميل اسنان | زراعه اسنان | اطباء #تقويم اسنا
شركة تسويق الكتروني|خدمات التسويق الالكترونى| اقوى شركات التسويق الكتروني|شركةالتسويق الالكترونى فى مصر والعالم العربى
إبادة الحشرات | #أباده الحشرات | أباده حشرات | أبادة#الحشرات | مكافحةحشرات | مكافحة #الحشرات | مكافحةحشرات| مكافحه حشرات | 01003006734 الخط الساخن19758| شركات رش حشرات | ابادة الصراصير | رش الصراصير | اباده الفئران | مكافحة الفئران | كيفية التخلص من الفئ
‫#‏المركز_الالماني_لابادة_الحشرات رقم 1 في #مصر
المركز الألمانى لإبادة الحشرات | المركز الألمانى لإبادةالحشرات والقوارض | المركز لألمانى لإبادة الحشرات| #المركز الألمانى لإبادة #القوارض | المركز # الألمانى_لإبادة #النمل و#الصراصير
شركات ابادة الحشرات | ابادة حشرات حشرات#النمل #الصراصير | #ابادة الحشرات بدون مغادرة المنزل شركة ابادة حشرات01003006734 | المركز الالمانى لابادة الحشرات | شركات ابادة حشرات | ابادة الحشرات المنزل | ابادة الحشرات بدون مغادرة المنزل | ابادة الحشرات بدون موا
مكافحة حشرات | مكافحه الحشرات | 01003006734|ابادة الحشرات |المركز الالمانى | ابادة حشرات ابادة الحشرات |ابادة حشرات|المركز الالمانى لاباده الحشرات | مكافحه حشرات |01003006734-24486510
فوائد استخدام المبيدات
المياه في المنشاّت الغذائية....الخواص الطبيعية والكيميائية لمياه الشرب
ايزو2005 نموذج
الإثنين مارس 27, 2017 4:28 pm
الإثنين مارس 27, 2017 4:15 pm
الإثنين مارس 27, 2017 4:12 pm
الجمعة أكتوبر 23, 2015 3:40 pm
الجمعة أكتوبر 23, 2015 3:39 pm
الجمعة أكتوبر 23, 2015 3:37 pm
الثلاثاء مارس 10, 2015 2:20 pm
الإثنين نوفمبر 25, 2013 12:44 pm
الثلاثاء يناير 01, 2013 11:01 am
الثلاثاء يناير 01, 2013 10:59 am
منار على
منار على
منار على
منار على
منار على
منار على
زهرة الياسمين
fahd11
حلمي القدسي
حلمي القدسي

شاطر|

تقنية الاليزا

استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي اذهب الى الأسفل
كاتب الموضوعرسالة
مشرف قسم صناعات الاغذية
avatar
حلمي القدسي
مشرف قسم صناعات الاغذية


عدد المساهمات : 350

نقاط : 3155

تاريخ التسجيل : 03/09/2011

العمر : 29


موضوع: تقنية الاليزا الأربعاء يناير 11, 2012 9:01 am




ELISA


Enzyme Linked
Immunosorbent



Assay


التحاليل
المناعية المرتبطة



v
تعريفات عامة


§
ما هي الأجسام المضادة Antibody


هي
مركبات موجودة ضمن الجهاز المناعي للجسم وتصنع بشكل خاص عند تعرض الجسم لأجسام
غريبة



l
Antigen


هو جسم
مسؤول عن إثارة الجهاز المناعي للجسم وبالتحديد إثارة الأجسام المضادة .



l
التحاليل المناعية Immunoassay


هي اختبارات بيوكيميائية لقياس مستوى
مادة معينة في السائل الحيوي



(سيرم,
بول,لعاب, دموع) بواسطة ارتباط
Antigen مع Antibody المخصص له.


l
Analyte


هي المادة الحيوكيميائية
التي يتم قياسها وفي التحاليل المناعية يكون
Analyte إما Antibody
أو
antigen


حالات Antigen


يكون Antigen
إما
:


l
موجود في الجسم بشكل طبيعي مثل الهرمونات.


l
يتم تصنيعه في الجسم في حالات مرضية مثال: هرمونHCG الذي
يفرز من خلايا المشيمة بشكل طبيعي أثناء الحمل,كما يمكن إفرازه في بعض أنواع
السرطانات حتى عند الرجال.



غير
موجود في الأحوال العادية مثل المخدرات.



مقدمة


l
يتم تصنيع الأجسام المضادة Antibodies في حال التعرض لأجسام غريبة Antigensوتكون هذه الأجسام المضادة ذات تخصصية والفة Specific Affinity
للأجسام الغريبة التي أثارت تصنيعها.



l
تتعرف الأجسام المضادة على الجزءantigenic determinant .








طرق تصنيع الأجسام المضادة الخاصة بالتحاليل المناعية


هناك
أكثر من طريقة لتصنيع الأجسام المضادة و أحد أكثر هذه الطرق شيوعا لتصنيع
Antibody
مخصص لجسم ما
(Antigen)هو حقن هذا الجسم لحيوان وبعد ذلك يتم استخلاص Antibody المطلوب
من سيرم هذا الحيوان.



ولكن هذا
Antibody
يسمى
polyclonal لأنه ناتج تصنيع عدة خلايا.


هناك طريقة لتصنيع Antibody أكثر تخصصا monoclonal Antibody وهو ناتج تصنيع
مجموعة خلايا متماثلة
تماما
cell
line
ونحصل على هذه الخلايا بدمج خلية مصنعة للجسم المضاد مع خلية
سرطانية لها القدرة على الانقسام إلى مالا نهاية.




ما هي تقنية ELISA


هذه
التقنية تستخدم لقياس تركيز مادة جزيئية مثل الهرمونات والعقاقير في السائل الحيوي
كالسيرم . هذه المادة الجزيئية تقاس عن طريق معرفة كمية الأجسام المضادة
Antibody
التي ارتبطت ب
Antigen.



تنقسم
إلى
:


1- قياسات مناعية تنافسية Competitive ELISA


2-
قياسات مناعية غير تنافسية
Sandwich ELISA


وتسمى أيضا قياسات مناعية مباشرة Direct ELISA


3-
قياسات مناعية غير مباشرة
Indirect ELISA


Competitive ELISA


في هذه الحالة يتنافس Antigen المطلوب قياسه في العينة معLabeled Antigen للارتباط بالجسم المضاد وفي هذه الحالة تكون
العلاقة عكسية بين كمية
Antigen المطلوب قياسه مع labeled Antigen
.



Sandwich ELISA


يكون
المطلوب الكشف عن
Antigen وقياس
تركيزه في العينة فيكون طبق الاليزا مغطى
بالجسم المضاد
Antibody .


1- يرتبط Antigen في العينة مع الجسم المضاد .


2- يتم غسل الطبق لإزالة الأجسام المضادة غير
المرتبطة .



3-وبعد ذلك تتم إضافة أجسام مضادة أخرى وتكون هذه الأجسام المضادة
مرتبطة بإنزيم .



4- يتم
غسل الطبق أيضا لإزالة الأجسام المضادة
غير المرتبطة.



5- ثم تضاف المادة الأساس للإنزيم ويتم حساب
كمية
Antigen
عن طريق قياس كمية ناتج التفاعل4.



Indirect ELISA


عندما
يكون المطلوب الكشف عن
Antibody وقياس تركيزه في العينة ففي هذه الحالة:


1- يضافAntigen المخصوص لطبق
الاليزا ويترك فترة حتى يلتصق.



2- يضاف السيرم المحتوى على أنواع مختلفة من Antibody
تسمى
primary
Antibody
.


3- يرتبط
Antibody
في السيرم مع
Antigen الموجود في الطبق .


4- يتم غسل الطبق لإزالة Antibody غير المرتبط.


5- يضاف Antibody آخر مرتبط بإنزيم Secondary Antibody وهذا يمكنه الإرتباط فقط في حال ارتباط Primary Antibody
بالعينة الموجودة في الطبق.



6- يتم
غسل الطبق لإزالة
Antibody غير
المرتبط.



7-تضاف المادة الأساس للإنزيم ويتم حساب كمية Antibody عن طريق قياس كمية ناتج التفاعل.


مثال على طريقة عمل ELISA


قبل
الشروع في العمل يجب قراءة التعليمات بدقة شديدة لأن أي خطأ قد يؤدي الى فساد التجربة وخسارة قيمة
Kit وهي مكلفة جدا


نستخدم Kit (مجموعة المحاليل المستخدمة في التحاليل
المناعية ) حيث أن لكل جسم مطلوب الكشف عنه
Kit مخصوص.



1-
يتم ترقيم الطبق الخاص المكون من
96 خانة (
wells ) بدقة وتستخدم الخانات wells
الأولى لرسم المنحنى القياسي
Standard curve


2- ثم يتم وضع العينة المراد فحصها في الطبق
ويفضل تكرار كل عينة مرتين أو ثلاث مرات
Duplicate or Triplicate
وبعد ظهور النتائج يؤخذ المتوسط



3-
تستخدم عينة ضابطة
Quality control sample وهذه العينة تأتي مع
Kit (مجموعة المحاليل ) وهي ذات تركيز محدد من قبل
الشركة المصنعة وتعامل تماما مثل العينة المفحوصة.



النتائج


بعد قراءة نتائج الإمتصاص في جهاز قارئ الاليزا نقوم برسم المنحنى
القياسي على ورق الرسم البياني بحيث نستخدم المحور السيني
x-axisللتركيز concentration والمحور
الصادي
y-axis للإمتصاص
Absorption
.


نقوم
بتحديد تركيزات المحاليل القياسية

standards
على المنحنى السيني
x-axis ثم نحدد قراءة كل محلول قياسي على المنحنى الصادي y-axis ونرسم المنحنى القياسي.





يستخدم هذا المنحنى لقياس تركيز كل عينة بحيث نأتي عند قراءة الإمتصاص
على المحور الصادي ونحدد النقطة المقابلة
لها على المنحنى وبعد ذلك نحدد التركيز
على المنحنى السيني.



نحسب تركيز العينة الضابطة من المنحنى
وإذا كان في الحدود الطبيعية المحددة من الشركة المصنعة فهذا يعني أن التجربة
ناجحة ويمكن اعتماد النتائج.



l http://www.edumedia-sciences.com/en/a543-direct-enzyme-linked-immunosorbent-assay-elisa


l ELISA


l http://www.sumanasinc.com/webcontent/animations/content/ELISA.html


l http://www.biology.ualberta.ca/facilities/multimedia/uploads/procedures/elisa-sound.swf





















_________________
سأل الممكن المستحيل : أين تقيم ؟ فأجابه في أحلام العاجز .
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
معاينة صفحة البيانات الشخصي للعضو
مشرفة
avatar
زهرة الياسمين
مشرفة


عدد المساهمات : 485

نقاط : 3360

تاريخ التسجيل : 02/05/2011


موضوع: رد: تقنية الاليزا الأربعاء يناير 11, 2012 9:35 am

woOoOow nice keep on

_________________
اللهم صلي وسلم وبااارك على اشرف خلق الله سيدنا محمد وعلى آله واصحابه اجمعين
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
معاينة صفحة البيانات الشخصي للعضو
مشرف قسم صناعات الاغذية
avatar
حلمي القدسي
مشرف قسم صناعات الاغذية


عدد المساهمات : 350

نقاط : 3155

تاريخ التسجيل : 03/09/2011

العمر : 29


موضوع: رد: تقنية الاليزا الخميس يناير 12, 2012 8:56 am


_________________
سأل الممكن المستحيل : أين تقيم ؟ فأجابه في أحلام العاجز .
الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل
معاينة صفحة البيانات الشخصي للعضو

تقنية الاليزا

استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي الرجوع الى أعلى الصفحة
صفحة 1 من اصل 1

صلاحيات هذا المنتدى:لاتستطيع الرد على المواضيع في هذا المنتدى
ESyemen :: كلية الزراعة :: قسم صناعات الأغذية-
جميع الحقوق محفوظة للجمعية | خدمات الجمعية | عن الجمعية